Transwell及Insert小室产品选择及使用指南

Transwell及Insert小室产品选择及使用指南

如何选择Transwell/Insert小室产品的孔径？

首先需要明确您所进行的应用是否需要细胞穿过小室膜上的孔。一般来说，共培养实验、Caco-2 Transport实验及构建细胞极化模型等不需要细胞穿膜，大多选择0.4μm或1.0μm等小孔径的产品。而在细胞迁移实验及侵袭实验中，细胞则需要穿过上室的膜、到达膜的背侧（少数情况下会落至下室中，如悬浮细胞的迁移/侵袭实验），因此需要选择较大孔径，（如肿瘤细胞的迁移、侵袭实验常选择8μm孔径的产品）。

下表为一些常见应用和细胞种类的使用孔径推荐，供您参考，同时也可以参考已发表的相关文献来辅助您的判断。对于一些要求严格的实验，我们建议在正式实验前选取一系列孔径进行预实验来确定最适合于您的细胞培养和特殊应用的尺寸。

 

实验应用类别	细胞种类	推荐孔径(um)
血管生成	内皮细胞，HMVEC，HUVEC	3.0
共培养	干细胞、神经元及多种其他细胞	0.4，1.0
表皮细胞极化	表皮细胞	0.4
迁移	内皮细胞，HMVEC，HUVEC	3.0
	嗜中性粒细胞，多形核白细胞(PMNs)	3.0
	淋巴细胞，巨噬细胞，单核细胞	3.0，5.0
	神经元细胞	3.0
	树突状细胞	3.0，5.0，8.0
	神经突	1.0，3.0
	上皮成纤维细胞	8.0
	白细胞	3.0，5.0
	平滑肌细胞	8.0
侵袭	黑色素瘤细胞	8.0
	神经胶质瘤细胞	8.0
	淋巴瘤细胞，Jurkat	5.0，8.0
	成骨细胞	8.0
	乳腺癌细胞	5.0，8.0
	内皮细胞	3.0，5.0，8.0
组织工程实验	人体皮肤模型	0.4，3.0
毒性试验	小鼠成纤维细胞	3.0
	人肺部细胞	0.4
转运及通透性研究	Caco-2	0.4，1.0
	MDCK	0.4，1.0

 

⚑ 实验细胞贴壁生长时的直径可能接近20μm，在进行迁移、侵袭实验时使用8μm孔径小室，细胞能顺利穿膜吗？

细胞在迁移、侵袭实验时，受到趋化因子的吸引，会挤压自身以穿过膜上的小孔，并非以贴壁生长时的铺展状态穿膜。相反，如果孔径过大，不利于细胞贴壁，也容易使细胞直接落入下室，无法正常进行实验。目前我司提供的小室产品最大孔径为8μm，能够满足大多数较大细胞（如多数肿瘤细胞）穿膜的需求。

 

⚑ 如何挑选小室膜的材质？
Corning品牌Transwell小室有聚碳酸酯（Polycarbonate, PC），聚酯（Polyesteror PolyethyleneTerephthalate，PET）以及聚四氟乙烯（Polytetrafluoroethylene，PTFE）三种膜材质。

Falcon品牌的Insert产品膜材质均为聚酯（PET）。

PC和PET膜材质应用都很广泛，二者的主要区别在光透性方面，即PC膜半透明，不太方便在培养的过程中观察上室细胞的形态；PET膜透明，方便在相差显微镜下观察细胞的状态。