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2243 人阅读发布时间:2020-03-11 09:31
蛋白质转染技术是DNA和RNAi转染的补充,是蛋白质功能研究和细胞路径研究的有力工具。而且转染抗体入胞浆,可以进行活细胞染色,不需要固定细胞,或在蛋白质水平沉默。
PULSinTM:Polyplus Transfection公司开发的一种有效转染功能蛋白/抗体到活细胞中的新型转染试剂。使用PULSinTM转染蛋白和抗体为细胞内蛋白功能研究提供了强有力的工具。
PULSin™为阳离子两性物质,可以通过正电荷外衣包裹许多蛋白质/抗体。PULSin™/蛋白复合物结合到细胞表面黏附分子——多配体聚糖。进入细胞和随后内涵体的释放步骤与基因转染的步骤是相似的。最终,负电荷的磷脂酰丝氨酸从复合物中排出蛋白质,将天然的蛋白质释放到胞浆中。对于阳离子聚合物转染,结合细胞以及进入细胞的步骤并不是蛋白转染的难点,而是后面的步骤(即在胞浆中的释放过程)才是蛋白转染的关键步骤。Polyplus公司利用两性内涵体释放因子成功解决了蛋白质在胞浆中的释放问题。
| 贴壁细胞系 | |||
|---|---|---|---|
| 3T3 L1 A549 BHK-21 CaSki CHO CV-1 HEK-293 |
60-80% 80% 30-40% 80-90% 80-90% 50% 45-55% |
HeLa HepaRG MCF-7 MLE-15 NIH-3T3 RAW 264.7 Si Ha |
80-90% 60-70 % 60% 60-75% 90-98% 40-50% 60-70% |
| 悬浮细胞系 | |||
| Jurkat THP-1 |
20-30% 10% |
K-562 | 20-30% |
| 原代细胞(贴壁) | |||
| Primary human fibroblasts Primary human hepatocytes Primary human keratinocytes Primary human visceral preadipocytes |
60-70% 50-40% 55-70% 60-75% |
||